抗蓝舌病病毒VP7和NS2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为建立蓝舌病病毒(BTV)的检测方法和研究该病毒蛋白的功能,本研究利用BTV血清8型(BTV8)免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备单克隆抗体(MAb).并以BTV8作为包被抗原建立间接ELISA方法,经筛选获得了8株稳定分泌抗BTV8 MAb的杂交瘤细胞株(1B2、1F6、2B1、2D10、3B6、3D9、4D4和4D12).Western blot结果显示,MAb 1F6、2B1、2D10、3B6、3D9与BTV8 VP7蛋白反应,MAb B2、4D4、4D12与BTV8 NS2蛋白反应.间接免疫荧光结果显示,该8株MAb与24型BTV血清型呈不同的反应论系.本研究所获得的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究提供了实验依据.     

Sf9细胞PHB2蛋白的原核表达及其抗血清的制备

为了研究Sf9细胞PHB2蛋白(Sf-PHB2)的功能及其对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因ie1的转录调控作用,本研究从昆虫细胞Sf9中扩增sf-phb2基因编码区,克隆至表达载体pET30a中,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达6His-Sf-PHB2重组蛋白.SDS-PAGE分析表明,表达的重组蛋白以...     

猪流行性腹泻病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗M蛋白单克隆抗体(MAb),本研究以截短表达的His-M重组蛋白免疫BALB/c小鼠;以截短表达的GST-M重组蛋白作为包被抗原,采用常规的淋巴细胞杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA进行筛选,得到一株稳定分泌抗M蛋白MAb.MAb亚类鉴定为IgG2b型,轻链为к链,杂交瘤细胞培养上清和诱导的小鼠腹水抗体效价分别为1:3000和1:2×105.Western blot试验表明该MAb能够识别重组及天然的PEDV M蛋白.间接免疫荧光试验表明该MAb能够与PEDV感染的Vero E6细胞产生特异性免疫荧光.     

Egg production forecasting: Determining efficient modeling approaches

Several mathematical or statistical and artificial intelligence models were developed to compare egg production forecasts in commercial layers. Initial data for these models were collected from a comparative layer trial on commercial strains conducted at the Poultry Research Farms, Auburn University. Simulated data were produced to represent new scenarios by using means and SD of egg production of the 22 commercial strains. From the simulated data, random examples were generated for neural network training and testing for the weekly egg production prediction from wk 22 to 36. Three neural network architectures-back-propagation-3, Ward-5, and the general regression neural network-were compared for their efficiency to forecast egg production, along with other traditional models. The general regression neural network gave the best-fitting line, which almost overlapped with the commercial egg production data, with an R(2) of 0.71. The general regression neural network-predicted curve was compared with original egg production data, the average curves of white-shelled and brown-shelled strains, linear regression predictions, and the Gompertz nonlinear model. The general regression neural network was superior in all these comparisons and may be the model of choice if the initial overprediction is managed efficiently. In general, neural network models are efficient, are easy to use, require fewer data, and are practical under farm management conditions to forecast egg production.     

4种新城疫油苗蛋鸡免疫力对比试验

为了解不同疫苗生产厂家生产的新城疫灭活疫苗的免疫效果,更好地开展新城疫的免疫工作,选用国内4个厂家所生产的新城疫灭活疫苗,免疫商品蛋鸡,依据免疫前后、攻毒后抗体水平变化趋势和攻毒后对鸡群的保护力,评估4种ND油苗的免疫效果。结果表明:3和4号疫苗组死亡保护力均为100%,而且3号和4号疫苗组产生的抗体水平较高、提升时间较早;而1号和2号疫苗组均有死亡,并且抗体水平与3号和4号疫苗组相比较低。由试验可知,不同生产厂家所生产的ND油苗质量参差不齐,免疫效果有较大差异。     

一步法RT—PCR检测大缸奶在BVDV清除计划中的应用

本文利用一步法RT—PCR对28个牛场共计50份大缸奶样进行了BVDV核酸检测。在与全群抗原检测结果对比后发现．9个已知存有PI牛的泌乳牛群,其大缸奶核酸检测均为阳性,其余41个已知无PI牛的泌乳牛群．除1个因为存在急性感染牛造成阳性结果外,其余40个均为阴性。由此可见,本方法对与泌乳牛群内是否存在PI牛可以做出准确判断,其检测灵敏度和特异性均为100％,阳性预测结果可信度为0．9（9／10）,阴性预测结果可信度为0．98（40／41）。此外．针对50个大缸奶样进行的抗体检测表明,对于已感染牛场,泌乳牛群是否存在PI牛,抗体水平没有明显差异（OD1．12±0．12vsOD1．34±0．23,P〉0．05）。实验室条件下,本试验使用的RT—PCR方法对于阳性乳的最低检出限为50uL/头,因此理论上,最多可从1000份样品中检出阳性乳成分（总体积为50mL）。综上可知,本试验确立的RT—PCR方法灵敏度高、特异性强,可对泌乳牛群是否存在PI牛进行准确预测,相比大缸奶抗体检测更具实际指导意义,联合ELISA—Ag使用时还可大幅度降低泌乳牛群BVDV清除计划的检测成本,因而值得推广使用。     

间接ELISA检测抗传染性法氏囊病病毒抗体方法的建立

采用原核表达的传染性法氏囊病毒(IBDV)核衣壳蛋白VP2作为诊断抗原,建立检测IBD血清抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被量为每孔174.67ng,待检血清最佳稀释度为1:40,待检血清样品的D492nm≥0.43Dpos+0.57Dneg判为阳性,反之判为阴性.对采自安徽省部分地区的979鸡血清样品进行检测,IBDV抗体阳性率为39.73%.结果证实,间接ELISA法用于IBDV血清抗体的监测具有良好的特异性,是一种快速简便的血清学方法,值得在基层推广应用.     

不同饲养方式对鸭蛋成分和蛋黄色泽影响的研究

采用单因素试验设计,研究圈养、网上平养和放养3种不同饲养方式对鸭蛋成分和蛋黄色泽的影响。常规方法检测鸭蛋成分。结果表明：饲养方式对蛋清干物质含量有显著的影响（P〈0.05）,放养鸭的蛋清干物质含量显著低于圈养和网上平养（P〈0.05）,圈养和网上平养之间差异不显著;饲养方式对蛋黄干物质含量影响不显著（P〉0.05）,但放养组最低,圈养组稍高,网上平养组最高;饲养方式对蛋清氨基酸的绝对含量有显著的影响（P〈0.05）,放养鸭蛋的蛋清氨基酸总量低于圈养鸭和网上平养鸭（P〈0.05）,圈养鸭和网上平养鸭差异不显著;但饲养方式对蛋清各种氨基酸占氨基酸总量的比值影响较小;饲养方式对蛋黄色泽、蛋黄干物质脂肪含量和鸭蛋风味有显著的影响（P〈0.05）,放养鸭的蛋黄色泽等级和蛋黄干物质中脂肪含量显著高于圈养鸭和网上平养鸭（P〈0.05）,鸭蛋风味也优于圈养鸭和网上平养鸭;圈养和网上平养之间差异不显著;综合评价3种饲养方式的蛋鸭所产的鸭蛋,总的营养物质含量相差不大,但放养鸭蛋口感好,味道美。     

脉冲电场处理对鸡蛋蛋白液特性的影响

采用高压脉冲电场处理鸡蛋蛋白液,研究了不同场强处理对蛋白液功能性质的影响.结果显示,蛋液pH值和电导率与场强的变化成正比,随场强的增加都有增大的趋势,且均表现为不同处理强度间变化不大;变性温度受影响较小,几种处理的变性温度基本相同;而蛋液黏度、凝胶弹性与场强的关系不明显,受影响较小.     

日粮添加蚂蚁粉对鸡蛋品质影响的研究

试验选用360只55周龄农大3号矮小蛋鸡,随机分为4组,每组3个重复,每个重复30只,三层阶梯式笼养.对照组饲喂基础日粮,试验组分别添加1%、2%、3%的蚂蚁粉.预饲期5 d,正饲期28 d,试验结束时进行蛋品质测定以及品尝试验,研究蚂蚁粉对蛋品质以及品尝者感官评价的影响.结果表明:蛋品质试验中,3%试验组比对照组蛋黄色泽高7.08%(P＜0.01),蛋白高度高15.09%(P＜0.05),添加蚂蚁粉对蛋重、蛋黄重以及蛋黄比没有明显影响(P＞0.05),而蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋壳重、料蛋比以及产蛋率也无明显变化.品尝试验中,品尝者对鸡蛋气味、蛋黄色泽和口感进行评价,认为4组间气味和口感无显著差异,虽然在蛋黄色泽上,1%试验组与对照组差异最大,但2%试验组的蛋黄色泽却更受品尝者欢迎.